基质胶的蛋白浓度越高,胶体越粘稠。如果浓度高于13.0 mg/mL,基质胶会显得非常厚重。ABW® Matrigengel 基底膜基质基质胶产品在未稀释前都会比较粘稠。粘稠的高浓度ABW® Matrigengel 基底膜基质(ABW® Matrigengel 基底膜基质 HC)不稀释也可以直接使用,如用于培养肿瘤细胞和/或血管生成因子,注射于小鼠体内后,细胞可以保持原位,便于原位分析和/或以后的切除;或者稀释后,按照标准浓度的ABW® Matrigengel 基底膜基质产品使用方法使用,具体稀释浓度根据实验需求确定。
除因为产品本身浓度高而粘稠外,基质胶的状态还与运输过程中温度的变化和储藏条件有关。整个运输过程中必须使用干冰冷藏。如果储藏ABW® Matrigengel 基底膜基质的冰箱带有自动除霜功能,冰箱除霜过程中升温,可能使基质胶成胶。所以,切忌将ABW® Matrigengel 基底膜基质储藏于此类冰箱中。为保证ABW® Matrigengel 基底膜基质的使用效果,冻融次数应该尽可能减少。拿到新的ABW® Matrigengel 基底膜基质后,请按照单次用量进行分装。每次融化操作,ABW® Matrigengel 基底膜基质都应该放置于冰上。如果ABW® Matrigengel 基底膜基质在成胶状态被冻住,再次融化时将不能成恢复液体。
可以的,已经有相关文章表明ABW® Matrigengel 基底膜基质可以用于ES/iPS细胞的分化研究。
ABW® Matrigengel 基底膜基质是一种从小鼠骨肉瘤中提取的重组基底膜, 新鲜提取的原料中主要包括以下成分:层粘连蛋白,IV型胶原, 巢蛋白,基底膜聚糖、表皮生长因子、类胰岛素生长因子及其他生长因子。这些蛋白构成了 ABW® Matrigengel 基底膜基质的基本结构。在22℃-37℃温度条件下,大分子间的共价键可以结合,促使 ABW® Matrigengel 基底膜基质形成凝胶。而在低温条件(如4℃)下,由于没有足够的能量促使共价键结合,所以 ABW® Matrigengel 基底膜基质呈现液体状态。
建议用户第一次融化后按照单次用量进行分装,保存。
首先需要检查细胞的接种浓度是否过高,ABW® Matrigengel 基底膜基质的用量应等同于细胞培养体系中培养基的用量。如果ABW® Matrigengel 基底膜基质被稀释到过低的浓度,形成的胶体容易从组织培养器皿表面分离。
4℃下低速离心,去除沉淀物 。
与细胞培养基或缓冲液混合过但未使用完的ABW® Matrigengel 基底膜基质,不建议保留再用。